重组肠激酶南京供货商 稳定货源,按需供应
产品信息
产品名称:Recombinant Enterokinase
来源:牛源
表达宿主:重组 E.coli
性状:澄清液体
分子量:25.8 ± 2.6 kDa
活性单位定义:在 25℃ , 12 -16 h 之内,将 0.5 mg 保存于 25 mM Tris-HCl(pH 8.0)缓冲液中的融合蛋白切割 95%所需的酶量 ,定义为 1 U。
产品概述
肠激酶( Enterokinase ,EK)是一种高度特异性的丝氨酸蛋白酶,可以专一识别 DDDDK 序列并在赖氨酸残基的 C 端进行切割。本品为重组牛源肠激酶轻链片段,可以在较宽的 pH 范围(4.5-9.5)和温度范围(4 ~ 45℃)内进行有效切割。Vazyme提供有 His-tag 和无 His-tag 两种肠激酶 ,客户可结合应用场景和纯化去除工艺进行选择。
产品优势
1、产能充足:5吨级生产线多批次生产,批产达亿U级别,多批次生产验证质量稳定;
2、GMP级:生产过程符合GMP要求;
3、质量文件完整:可保障无动物源性、无外源病毒污染等,质量文件齐全。
4、质检体系完善:配套专一性酶活、酶残留检测试剂盒,提供入场检支撑、杂质风险控制策略。
5、规格定制:规格可根据客户需求定制。
保存条件
储存条件 :-30 ~ -15℃ ;
复验期:24 个月。
产品应用范围
1、用于切除重组蛋白 N 端融合标签;
2、用于活化胰蛋白酶原;
3、生物制药领域常用于重组蛋白 、多肽类药物的生产制备 ,例如 GLP-1 及其类似物等。
建议反应体系
重组 EK:200-2000 U 可酶切融合蛋白 :0.1-1 g/L ( 1 L);
反应时间:25℃反应过夜或者 24 h ,用 SDS-PAGE 或者 HPLC 检测酶切效果;
4℃反应酶切 ,需要将酶切时间延长至 48-64 h ,或增加 2-3 倍酶量。
注意事项
1、在>200 mM 咪唑 ,或>200 mM NaCl ,或>5%甘油条件下 ,酶切效果受影响 ,可将样品进行稀释或者透析 ,再进行酶切 。如果样品 溶液中含有上述成分中的一种或多种,且不便去除,此时适当增加酶量或延长酶切时间,也可达到较好的酶切效果。磷酸盐对 Enterokinase 发挥活性有影响 ,因此尽量避免酶切体系内磷酸盐的存在。
2、本司生产的肠激酶比活高 ,使用过程中加量较少 ,可不考虑其除去 。如果确实需要去除 rEK ,建议的去除方法如下:
a.使用亲和层析 ,可以利用苯甲脒亲和填料纯化去除 ,由于肠激酶是一种丝氨酸蛋白酶 ,可以在纯化时与苯甲脒填料结合 ,从而达到 纯化目的;
b.使用离子交换填料 ,pH 8.0 条件下,肠激酶与 DEAE 填料结合 ,并且在0.15 M NaCl 中可以被洗脱 ,可以利用目的蛋白与肠激酶电 荷差异以及与 DEAE 填料的结合或洗脱的不同条件将二者进行分离;
c.本产品含有 His标签 ,可使用 Ni 柱亲和层析吸附去除。
3 、推荐反应体系是基于我司实验条件下所获得 ,使用时可根据实际情况进行调整。
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